兵庫県立健康生活科学研究所健康科学研究 ン 研究報告 第9号2018
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［ノート］
兵庫県における
2016/17
ー ン
インフルエン
ウイル
性状解析
押部
智宏
荻
美貴
井
伝
近
嗣
稲田
忠明
Characteristic Analysis of the Seasonal Influenza Viruses in Hyogo
Prefecture
,
Japan
,
during the 2016/17 Season
Tomohiro
O
SHIBE,
Miki
O
GI,
Denshi
T
AKAI,
Masatsugu
C
HIKAHIRAand
Tadaaki
I
NADAInfectious Disease Research Division
,
Public Health Science Research Center
,
Hyogo Prefectural
Institute of Public Health and Consumer Sciences 2-1-29
,
Arata-cho
,
Hyogo-ku
,
Kobe 652-0032
,
Japan
In Hyogo prefecture, Japan, influenza activity during the 2016/17 influenza season was the second smallest in the past 5 seasons. The AH3 subtype (80%) predominated over B (Victoria lineages) (12%), B (Yamagata lineages) (5%) and AH1pdm09 (3%) viruses.
The HA genes of AH1pdm09 viruses fell into the genetic subgroups 6B.1. The HA genes of AH3 viruses fell into the phylogenetic clade 3C.2a including A/Hong Kong/4801/2014 (2016/17 and 2017/18 season vaccine strain).
The HA gene sequences of B (Victoria lineage) viruses belonged to genetic group 1A, the B/Brisbane/60/2008 genetic group. The HA genes of B (Yamagata lineage) viruses fell within the genetic clade 3 including B/Phuket/3073/2013 (2015/16～2017/18 season vaccine strain).
じめに
イン エン ，38℃以 発熱，頭痛，全身倦怠
感筋肉痛 関節痛 主症状 疾患 あ ，稀 肺炎，
急性脳症等 併発 重症化 あ ． 病原
季節性 イン エン ウイ ，A型 びB
型 2 型 分類 ， 抗原性 違い A型
2009 ン ッ 引 起 AH1pdm09 A
香港型 (以 AH3型) ，B型 Yamagata系統 び
Victoria系統 4 イ 分類 ． ウイ
宿主 免疫 逃 少 変異 繰
返 ，流行 ウイ イ ，遺伝子変異，
感染症部
請求先：〒652-0032 神戸市兵庫区荒田町2-1-29
兵庫県立健康生活科学研究所 健康科学研究 ン
感染症部 押部 智宏
抗原性 性状変化 把握 ， 季 ワ ン株
選定等 イン エン 対策 行う 重要 あ ．
当所 ，感染症発生動向調査 業 一環 イン
エン ウイ ベイ ン 実施 ，
県内 イン エン 様疾患患者 検体 ウイ 分
離， 定，遺伝子解析等 性状解析 行 い ．本稿
2016/17 ン 調査結果 い 報告 ．
材料と方法
1. 検体
2016/17 ン (2016 第35逬 (8 29日～9 4日) 2017 第34逬 (8 21日～27日) ) 県内
指定提出機関 (21 所) 採 286検体 び小
学校等 施設 団感染 疑い 例，重症例等 健康
福祉 務所 採 10検体 合計296検体 材料
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Fig. 1 Weekly cases of Influenza-like illness per sentinel clinic from 2014/15 season to 2016/17 season in Hyogo prefecture, Japan
Week 䠄Week䠅 立感染症研究所 示 Real-Time RT-PCR法あ い
RT-PCR法 行 1)．
3. イン エン ウイ 分離
ウイ 分離 既報 2)，咽頭 い液 MDCK
胞 接種 ， ン存在 5%CO2，33℃，7
日間 養 ． 胞変性効果 (CPE) 養
清 ，1.0% ッ 赤血球あ い 0.5%ニワ 赤
血球 赤血球凝 試験 (HA) 行 3),4)．
4. イン エン ウイ 株 定
AH1pdm09，AH3型 びB型 定 ，赤血球凝 抑 (HI) 試験法 用い 3),4)． 定用 標準抗血清 国
立感染症研究所 分与 免疫ウ 抗血清
A/California/07/2009 (H1pdm09) ，A/Hong Kong/4801 /2014 (H3) ，B/Texas/2/2013 (Victoria系統) びB/ Phuket/3073/2013 (Yamagata系統) 使用 ．
5. イン エン ウイ 遺伝子解析
RT-PCR法 増幅 HA遺伝子 HA1領域 イ
エン 法 塩 配列 決定 ，最尤法
系統樹解析 行 ．解析 用い 代表株 選定や
， 称等 分類 ，The Crick
Worldwide Influenza Centre (WIC) 国立感染症
研究所 報告 い 5),6)． ，ワ ン株や代表
株 HA 遺伝子 塩 配列 ，GISAID (The Global Initiative on Sharing All Influenza Data)
(EpiFluTM) 使用 ，Fig.4～7 ，引用 株
横 EpiFluTM Isolate ID 示 ．
6. Real-Time RT-PCR法 抗イン エン 薬剤耐
性株 検出
国立感染症研究所 示 Real-Time RT-PCR 法
(Allelic discrimination法) ， 耐性
指標 NA ン 275番目 ア ノ酸
ン ン 置換 (H275Y) 株 検出
1) ．
結果及び考察
1. 県内 イン エン 流行状況
2014/15 ン 本 ン 感染症発生動
向調査 定点あ 逬 イン エン 様疾患
患者数 Fig. 1 示 ．
定点あ 逬 患者数 ，全国 調査 1逬遅
2016 第47逬 (11 21日～27日) 流行開始 指
標 1.0人 超え，過去5 ン 最 早い流行
7)．そ 後急速 増加 全国 2017
第4逬 (1 23日～29日) 警報水準 定点あ
30人 超え 迎え 7)． 値 39.3
人 ，過去5 ン 2015/16 ン 40.8
人 あ ．第5逬 (1 30日～2 5日) 減少 転 ，第6逬 (2 6日～12日) 26.6人
警報水準 回 ．警報水準 持続期間 2逬間
あ 過去3 ン 最 短 ．
そ 後 徐々 減少 第19逬 (5 8日～14日)
患者数1.0人未満 ．本 ン 流行期間 24
逬間 ，過去5 ン 中 最長 あ ． 期間
定点あ 積患者数 244 人 過去5 ン
2012/13 ン 211人 い 2番目 少 ．
2. 県内 イン エン ウイ 分離 検出状況
本 ン イン エン ウイ 分離 検出状
況 Fig.2 示 ．
検査 296検体 う 287件 (97%) イン
エン ウイ 検出 ．内訳 ，A 型 238 件
(83%) ，B型 49件 (17%) ，A型 多 検出 ． 全国 調査 A型 88%，B型 12% A型 多
検出 7)．
過去 B型 検出割合 ，12/13 ン 全
検出数 32%8)，13/14 ン 45%9)，14/15
ン 24.5%10)，15/16 ン 44% 占 い 11)，
本 ン 直近 5 ン 最 低 ．
本 ン 亜型 (系統) 内訳 ，AH3型 229件 (80%) ，B 型 (Victoria 系統) 34 件 (12%) ，B 型 (Yamagata系統) 15件 (5%) ，AH1pdm09 9件
(3%) あ ，AH3型 検出割合 最 ．
各亜型 検出状況 過去 比較 ，A型
2012/13 ン AH3型 主流 8)，2013/14
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2015/16 ン AH1pdm09 主体 11)，
2012/13 ン以降 ， 亜型 隔 流
行 ン い ，本 ン AH3型
流行 ， 様 隔 ン ．
一方，B型 ，2013/14 ン Yamagata系統 67%9)，2014/15 ン Yamagata系統 91%10)，
2015/16 ン Yamagata系統 64% 占 11)，
2013/14 ン以降 Yamagata系統 優勢 あ ．
本 ン 4 ンぶ Victoria系統 69% 多
占 ．全国 調査 Victoria系統 61% 優勢
7)，県内 様 あ ．
3. 逬 イン エン ウイ 分離 検出状況
本 ン 逬 イン エン ウイ 分離
検出状況 Fig.3 示 ．
本 ン 第35逬 調査 開始 ，AH3型
第39逬 (9 26日～10 2日) 本 ン初 検出
，そ 後 散発的 検出 ，流行開始前 第46逬
12件検出 ．
流行開始 第47逬 第4逬 過 減少
転 第5逬 期間 ，AH3型 127件，AH1pdm09
1件 ，B型 検出 ．
そ 後，警報水準 回 第6逬 流行 持続
第18逬 期間 ，AH3型 89件，B型 (Victoria 系 統) 31件 ，B型 (Yamagata系 統) 14件 ，
AH1pdm09 5件 4種類 ウイ 検出 ．
全検出数 80% 占 AH3型 ，流行開始 第47逬
第18逬 終息 全期間 わ 連続 検出
，第51逬 AH1pdm09 1件検出 以外 第39 逬 第5逬 全 AH3型 占 ．一方，AH1pdm09
主 流行後半 終息後 散発的 検出 ．
B型 ，流行 後 第6逬 検出 始 ，第20
逬 連続 検出 ．例 ， 後 後半 流
行 ，B型 検出数 A型 回 主流 多
い ，本 ン B型 検出割合 低 ，B型
流行 例 小規模 あ ．
3%
80%
12%
5%
AH1pdm09 AH3 B (Victoria lineage) B (Yamagata lineage) N=287Fig. 2 Proportion of isolation/detection of influenza virus during 2016/17 season in Hyogo prefecture, Japan
0 5 10 15 20 25
39 42 44 45 46 47 48 49 50 51 52 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 23 25 27 30
AH1pdm09
AH3
0 5 10 1539 42 44 45 46 47 48 49 50 51 52 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 23 25 27 30
B (Yamagata lineage)
B (Victoria lineage)
N u m b e r o f is o la ti o n /d e te c ti o n
Fig. 3 Weekly isolation/detection of influenza virus during 2016/17 season in Hyogo prefecture, Japan 䠄week䠅 䠄week䠅
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- 8 - 逬以降 ，AH3型 加え B型 (Victoria系統) ，B型 (Yamagata 系統) ，AH1pdm09 混合流行
考え ．
4. 県内分離ウイ 株 遺伝子解析
AH1pdm09ウイ 分離株 HA ン (HA1領 域) 遺伝子系統樹解析 結果 Fig.4 示 ．
AH1pdm09ウイ 1～8 区分 ，
6 6A，6B，6C 分類
12)．2014/15 ン 県内株 解析 ，D97N，
S185T びK283E ア ノ酸置換 加え ，K163Q A256T 置換 持 6B あ 10)．2015/16
ン 分離株 ， 6B内 S84N，S162N， I216T置換 持 6B.1 V152T，V173I置換
持 6B.2 分類 ，県内株 21株
中16株 (76%) 6B.1, 5株 (24%)
6B.2 属 11)．本 ン 県内解析株
2017/18 ン ワ ン株 あ A/SingaporeGP
1908/2015 6B.1 分類 ．
国立感染症研究所 本 ン 国内分離株 解
析 株 6B.1 13)，県
内分離株 様 結果 あ ． ，国内分離株
解析 形 A215G置換 持 群 13)，県内解析
株 認 ．
AH3型ウイ 分離株 HA ン (HA1領域)
遺伝子系統樹解析 結果 Fig. 5 示 ．
AH3 型ウイ ，2012/13 ン以降
3C 主流 14)，2013/14 ン
3C A/Texas/50/2012 代表 3C.1 3C.2，
3C.3 3 分類 15)．2014/15
ン以降，3C.2 2016/17，2017/18 ン 2
期 連 続 選 定 ワ ン 株 あ A/Hong
Kong/4801/2014株 代表 3C.2a
分岐 ，一方，3C.3 ，2015/16 ン ワ ン株 あ A/Switzerland/9715293/2013 代 表
3C.3a 3C.3b 追加 6), 12)．
2014/15 ン 県内AH3型ウイ 株
3C.2a又 3C.3a 分類 10)．2015/16
ン 3C.2a 内 N171K置換 持
3C.2a1 新 形 ，県内株
3C.2a1 分類 11)．
本 ン 分離株 解析 29株 A/Hong
Kong/4801/2014株 3C.2a 属
い ．解析 29株中12株 (41%) N171K置換
持 3C.2a1 属 ， 内R142G，N121K
やN31S置換 持 株 1株 あ ．
解析 29株中15株 (52%) T131K，R142K
置換 持 ， 内 13株 R216Q置換 持 い ．
，残 2株 (7%) N31S，D53N，R142G，S144R， N171K，I192T，Q197H 置換 持 い ．
全国 調査 解析 株
3C.2a 属 ， 内 66.7%
3C.2a1 あ ，そ ，T131K，R142K置換 群，N121， S144K置換 群 びN31S，D53N，R142G，S144R， N171K，I192T，Q197H置換 群 4群 分類 13)．
県内 結果 比較 3C.2a1，T131K，
R142K置換 群 びN31S，D53N，R142G，S144R， N171K，I192T，Q197H 置換 群 県内株 確認
，N121K，S144K置換 群 属 株 認 ．
本 ン 県内株 遺伝子解析 ，3C.2a
内 少 3群 分類 や
群内 7 ア ノ酸置換 群 少数
確認 ，ウイ 遺伝子 多様化 逭
い 明 ．
B型 (Victoria系統) 分離株 HA ン (HA1領 域) 遺伝子系統樹解析結果 Fig. 6 示 ．
Victoria系統 ，B/Brisbane/60/2008株 代表
1A L58P 置換 持 1B
分類 14)．2014/15 ン 県内分離株 V146I
持 1A あ 10),11)，2015/16 ン
解析株 様 V146I 持 1A 属
11)．
本 ン 解析株 11 株 ， 2015/16
2017/18 ン 3 期連続 ワ ン株
B/Texas/02/2013株 1A 属
，V146I, I117V ア ノ酸置換 い ． 内
8株 K209N置換 持 ，HA1 解析領域
塩 配列 一致 ， 一株 考え
， 株 3 頃 中心 県内 流行 い 思わ
．
全国 調査 ，本 ン 分離株
1A 属 ，N129D，V146I，I117V ア ノ酸
置換 伴 13)， 々 結果 一致 ．
，2016 以降 ア 合衆国 少数分離
い HA ン 162番目 び163番目 ア ノ酸
損株 5)，分離 ．
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- 9 - Yamagata系統 ，B/Florida/4/2006株 代表
1，R48K，P108A びS229G ア ノ酸置換 特徴 2 S150I，N165Y びS229D ア
ノ酸置換 持 3 区分 14)．2013/14
ン 県内分離株 2 3 混在 9)，
2014/15 ン ， L172Q置換 持
3 分類 10)，2015/16 ン L172Q ，M251V
置換 持 3 属 ．
本 ン 分離株 解析 結果，前 ン
様 L172Q ，M251V置換 持 ，2015/16 3期連続 ワ ン株 B/Phuket/3073/2013株
3 属 い ． 内 5株 T76I置
換 持 ，HA1領域 配列 一致 一株
考え ，2 中心 県内 流行 思わ ．
全国 解析 ，本 ン 3 属
13)，県内 様 結果 あ ． ，2016
以降 ン ュや ウ ア ア等 一部地域
分離 い Victoria系統 NA遺伝子 入 替わ
アソ ン 株 5)， 々 解析 株 含
い ．
5. 抗イン エン 薬剤耐性株 検出
AH1pdm09ウイ 株7株 い ，Real-Time
RT-PCR法 抗イン エン 薬耐性株 調査
結果，H275Y置換 耐性株 検出 ．
2007/8 ン 耐性 持 Aソ連型
(AH1型) イン エン ウイ 株 急増 例
あ ，今後 検出動向 注視 必要 あ ．
結
論
兵庫県 2016/17 ン イン エン
流行 過去5 ン 2番目 小 い規模 ，主
AH3型 80% 占 ，B型 (Victoria系統) ，B型 (Yamagata系統) び AH1pdm09ウイ 検出
．
遺伝子系統樹解析 結果，AH1pdm09ウイ
6B.1 属 ，AH3型ウイ 2016/17，
2017/18 ン 2期連続 選定 ワ ン株
あ A/Hong Kong/4801/2014株 3C.2a 属 ．B型 (Victoria系統) ワ ン株
1A 属 ，B型 (Yamagata系統) 分離株
い ワ ン株 3 属 ．
謝
辞
本研究 実施 あ ，検体採 ，連絡調整
協力い 県疾病対策課，県 健康福祉 務
所並び 指定提出機関 深謝致 ．
文
献
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エン 診断 ニュア (第3版) (2014)
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．ウイ 実験学各論，改訂 版，国立予防衛生研
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冊，各論1，厚生省監修，第3版，2-24,，日本公衆衛 生協会(2004)
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9)
押部智宏，荻美貴， 井伝 ，岡藤輝夫 ：兵庫県 2013/14 ン イン エン ウイ
分離株 性状解析．兵庫県立健康生 活科学研究 所 健康 科学研究 ン 研究報 告 ，6，1-11 (2015)
10)
押部智宏，荻美貴， 井伝 ，岡藤輝夫 ：兵庫県 2014/15 ン イン エン ウイ
- 10 - 分離株 性状解析．兵庫県立健 康 生 活 科 学 研 究 所 健 康 科 学 研 究 ン 研 究 報 告 ，8，7-15 (2017)
12) 国立感染症研究所感染症疫学 ン ：IASR病原微 生物検出情報 ( 報) ，36，第11号，199-207 (2015)
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14) 国立感染症研究所感染症疫学 ン ：IASR 病原 微生物検出情報 ( 報) ，34，第11号，325-339 (2013)
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